2021年2月23日，北京大学第三医院（北医三院）李默课题组卵巢癌发生相关研究成果和乔杰闫丽盈课题组关于早期胚胎发育机制方面的研究成果，同时在国际学术期刊《自然通讯》(Na**re Communications)上在线发表。

卵巢癌是妇科致死率最高的恶性肿瘤，严重危害女性生命健康及生育能力。由于其异质性强及转移率高，该疾病的早期诊断与治疗一直是肿瘤领域研究的重点与难点。李默课题组主要从事肿瘤的分子发生与治疗新策略研究。近年来，主要通过化学生物学、分子生物学等交叉学科新技术，发现、解析临床中重要科学问题。

此项研究中，李默课题组发现BRCA1伴侣基因BARD1的单突变（P24S或R378S）不产生致癌表型，而当两单突变顺式存在时，则联合产生致癌效应，导致BRCA1/BARD1复合体功能异常及基因组紊乱。该研究提出“非强表型突变”驱动肿瘤发生的可能，揭示了人体内大量无表型突变或“良性”突变的潜在危机，也为家族型卵巢癌/乳腺癌的早期诊断提供了重要依据；同时提示，BARD1类似突变肿瘤患者适用于PARP抑制剂的靶向治疗。  

BARD1双突变导致BRCA1/BARD1复合体DNA修复异常及肿瘤发生

北京大学第三医院李默研究员为该论文的通讯作者，李文静博士生和顾晓阳博士后为该论文的共同第一作者。该研究受国家自然科学基金面上项目等资助，以及国家妇产疾病临床医学研究中心平台资助。

此研究成果为该课题组系列研究成果之一。在课题组前期研究中发现，小分子多聚物PAR与抑癌基因BRCA1的分子联系，揭示靶向化疗药物PARP抑制剂在卵巢癌与乳腺癌的作用机理，拓展了该化疗药物在临床患者的适用范围(Cancer Cell, Genes & Development, PNAS）；同时，课题组积极开展交叉领域合作，在肿瘤细胞RNA代谢、CRISPR技术改良等方面也取得突出成绩，为转化医学提供了新思路(Cell Research, Na**re Chemical Biology, Science Advances)。

哺乳动物胚胎发育起始于受精卵。胚胎在卵裂期发生合子基因组激活（ZGA），不断分裂、分化，形成具有内细胞团（ICM）和滋养外胚层（TE）细胞的囊胚。这一过程中发生了剧烈的转录和表观遗传变化。乔杰团队前期完成了对配子及早期胚胎各发育时期转录组、甲基化组等图谱的绘制，为生殖领域相关研究提供了重要的线索。早期胚胎发育分子事件变化剧烈，同一阶段不同胚胎及同一胚胎内不同的细胞间均存在较高异质性，这对于胚胎发育的转录和表观遗传学调控研究十分重要。

近日，乔杰闫丽盈团队开发了一种单细胞多组学测序技术（scNOMeRe-seq），该技术可同时对单个细胞的RNA表达、DNA甲基化、染色质可及性进行分析。团队利用这一技术首次对哺乳动物植入前胚胎在单细胞分辨率上多个层面的调控关系进行了全面联合分析。

原文链接：https://www.na**re.com/articles/s41467-021-21409-8

该研究的主要发现有：

1.利用胚胎中单细胞DNA甲基化信息的特征，成功实现了对从合子到八细胞发育阶段的每个卵裂球进行遗传谱系重建分析；在此基础上，进一步研究发现，胚胎在前三次分裂过程中，胚胎中卵裂球间的转录异质性逐渐增加，细胞的不对称分裂可能是导致卵裂球在前三次分裂过程中转录组异质性逐渐增加的主要原因；

2.既往研究发现，卵母细胞基因组在转录活跃的基因区高度甲基化，而在基因间区呈低甲基化。精子基因组在基因间区处于高甲基化水平。本研究发现，在植入前胚胎发育过程中，母本基因组高甲基化区域主要富集在基因区域，而父本基因组高甲基化区域主要富集在远端的基因间区。结果提示，来源于卵母细胞和精子的等位基因间的DNA甲基化水平的差异在整个植入前胚胎发育过程中维持不变。进一步研究发现，在植入前胚胎发育过程中基因区域DNA甲基化与转录的正相关主要由母本基因组所致，父本基因区域的DNA甲基化与基因转录不相关；

3.通过对植入前胚胎的转录组和染色质开放性的动态变化进行整合分析，发现了一系列可能参与调节ZGA过程的顺式作用元件。包括多种组蛋白修饰（H3K4me3，H3K27ac和H3K27me3）在内的多个层面表观遗传学修饰，并发现重复元件精确调节这些顺式作用元件的活性，可确保合子基因组的正确激活。此外，单细胞水平转录因子活性和转录水平分析表明，Klf4、Rarg和Nr5a2在ZGA中可能具有重要作用；

4.研究确定了参与调节囊胚ICM/TE特异性转录调控网络的顺式作用元件，其中部分顺式作用元件早在合子时期已被激活，其余部分在发育过程中逐步激活。参与TE谱系特异性转录因子（Tcfap2a和Gata家族）在激活TE分化和抑制ICM分化中起着双重作用。

以上研究不仅为植入前胚胎发育过程中的功能性调控提供了新的见解，而且为表观遗传调控机制的解析提供了启示。  

scNOMeRe-seq示意图

北京大学第三医院闫丽盈研究员和乔杰院士为该论文的通讯作者，王洋博士后、袁鹏博士、严智强博士和杨铭博士为该论文的共同第一作者。该研究得到了国家重点研发计划、国家自然科学基金和北京大学临床科学家计划专项支持。

北医三院国家妇产疾病临床医学研究中心成立于2014年，在中心主任乔杰院士的带领下，研究领域重点围绕生殖障碍性疾病研究、辅助生殖技术安全性、胚胎发育与遗传诊断、生育力保护保存、围产保健与胎儿医学、妇科恶性肿瘤诊治等，旨在建立针对女性生殖健康的全方位诊疗防控网络体系。

目前，该中心拥有中国工程院院士1名、美国人文与科学院外籍院士1名，教育部“长江学者特聘教授”1名，并拥有10余名突出人才，已成为一支集基础研究、临床实践、公共卫生于一体的国家妇产疾病临床研究团队。团队承担了国家科技支撑计划、国家重点研发计划、卫生部公益性行业科研专项、国家自然科学基金委重点专项和创新研究群体项目等多项国家重大科研项目，荣获国家科学技术进步奖二等奖3项、省部级一等奖3项、全国创新争先奖1项，在NEJM、JAMA、Lancet、BMJ、Na**re、Science、Cell等国际顶级期刊上发表学术论著300余篇。

来源：北京大学医学部新闻网

供稿人：刘培培